液相色譜儀的分離原理基于混合物中各組分在固定相和流動相之間分配系數的差異。當流動相攜帶樣品通過色譜柱時，由于不同組分與固定相的相互作用力不同，導致它們在色譜柱中的滯留時間產生差異。這種差異使得各組分在流動相中的遷移速度不同，從而實現分離。具體而言，極性低的組分與非極性固定相作用力強，保留時間長；極性高的組分與固定相作用力弱，隨流動相快速流出。